Ngwa Ngwa RNAprep Dị Ọcha
Atụmatụ
Ihe kachasị mma maka anụ anụmanụ na -eme ka usoro ahụ dị mfe ma dịkwa mma.
DNase nke Pụrụ Iche na -ebelata mmetọ DNA nke mkpụrụ ndụ ihe nketa.
NA RNA dị elu ma dị njikere iji dị mma maka ngwa mgbada mgbada.
Enweghị mmịpụta phenol/chloroform, enweghị LiCl na mmiri ozuzo ethanol, na enweghị centrifugation gradients CsCl dị mkpa, nke na -eme ka usoro ahụ dị nchebe na ntụkwasị obi.
Ngwa
A na-akpọ RT-PCR.
■ Northern Blot, ntụpọ ntụpọ.
PCR ezigbo oge.
Analysis Nyocha mgbawa.
Nnyocha PolyA, ntụgharị in vitro, nyocha nchedo RNase na mkpuchi mkpụrụ ndụ.
Enwere ike ịhazi ngwaahịa niile maka ODM/OEM. Maka nkọwa,biko pịa Ọrụ ahaziri (ODM/OEM)
  |
Ihe: embrayo 20 mg (ụbọchị 13), akụrụ 15 mg, imeju 10 mg, splin 15 mg, 10 mg thymus, akpa ume 20 mg Usoro: Mkpokọta RNA sitere na anụ ahụ dị iche iche nke oke mere ka ọ dị ọcha site na iji RNAprep Pure Tissue Kit. Nsonaazụ: Foto agarose gel electrophoresis ka egosiri n'elu. Ejiri 2-4 μl nke 100 μl eluates kwa otu ụzọ. M: TIANGEN DNA Marker III; Lane 1-2: Embryo (ụbọchị 13); Ụzọ 3: Akụrụ; Ụzọ 4-6: Imeju; Ahịrị nke 7: Nkwa; Ahịrị 8: Thymus; Ụzọ 9: Akwara. A na -eme electrophoresis na 6 V/cm maka nkeji 30 na 1% jel agarose .. |
A-1 Cell lysis ma ọ bụ homogenization ezughị
---- Belata ojiji nlele, mụbaa ọnụọgụ ihe nchekwa lysis, mụbaa homogenization na oge lysis.
A-2 Ego nlele buru oke ibu
---- Belata ọnụ ọgụgụ nlele ejiri ma ọ bụ mụbaa ọnụọgụ ihe nchekwa lysis.
A-1 lysis sel zuru oke ma ọ bụ homogenization
---- Belata ojiji nlele, mụbaa ọnụọgụ ihe nchekwa lysis, mụbaa homogenization na oge lysis.
A-2 Ego nlele buru oke ibu
---- Biko rụtụ aka na ikike nhazi kacha.
Apụghị A-3 RNA kpamkpam na kọlụm
---- Mgbe agbakwunyere mmiri RNase-Free, hapụ ya maka nkeji ole na ole tupu ịmịcha.
A-4 Ethanol dị na elu
---- Mgbe ịsachasịrị, centrifuge ọzọ wee wepụ ihe ịsa ahụ dịka o kwere mee.
A-5 ewepụghị usoro ọdịbendị kpamkpam
---- Mgbe ị na-anakọta mkpụrụ ndụ, biko gbaa mbọ hụ na ị wepụrụ usoro ọdịbendị ka enwere ike.
A-6 Mkpụrụ ndụ echekwara na RNAstore anaghị agbasasị nke ọma
---- njupụta ụlọ ahịa RNA karịrị nkezi ọdịbendị sel; yabụ ekwesịrị ịbawanye ike centrifugal. A na -atụ aro ka centrifuge na 3000x g.
A-7 Ọdịnaya RNA dị ala na ụba na nlele
---- Jiri nlele dị mma chọpụta ma ọ bụrụ na nlele ahụ kpatara obere mkpụrụ.
A-1 Ihe a abụghị nke ọhụrụ
---- Ekwesịrị idobe anụ ahụ ọhụrụ na nitrogen mmiri mmiri ozugbo ma ọ bụ tinye ya ozugbo na reagent RNAstore iji hụ na mmịpụta ahụ.
A-2 Ego nlele buru oke ibu
---- Belata ego nlele.
A-3 RNase mmetọn
---- Ọ bụ ezie na ihe nchekwa enyere na ngwa ahụ enweghị RNase, ọ dị mfe imetọ RNase n'oge usoro mwepụ yana ekwesịrị iji ya mee nke ọma.
A-4 mmetọ Electrophoresis
---- Dochie ihe nchekwa electrophoresis wee gbaa mbọ hụ na ihe ndị na-eri ihe na ihe nchekwa na-enweghị mmetọ RNase.
A-5 Oke oke maka electrophoresis
---- Belata ego nlele nlele, itinye nke ọma ọ bụla ekwesịghị ịfe 2 μg.
A-1 Ego nlele buru oke ibu
---- Belata ego nlele.
A-2 Ụfọdụ nlele nwere ọdịnaya DNA dị elu ma enwere ike iji DNase gwọọ ya.
Mee ọgwụgwọ DNase na-enweghị RNase na ntinye RNA enwetara, enwere ike iji RNA mee ihe maka nnwale ndị na-esote mgbe ọgwụgwọ gasịrị, ma ọ bụ ihe mkpocha RNA nwere ike mee ka ọ dị ọcha.
Maka iko iko, sie na 150 Celsius maka awa 4. Maka arịa plastik, mikpuru n'ime 0.5 M NaOH maka nkeji iri, wee jiri mmiri na-enweghị RNase sachaa ya nke ọma wee sterilaiz iji wepụ RNase kpamkpam. Ihe reagents ma ọ bụ azịza ejiri mee nnwale ahụ, ọkachasị mmiri, ga -abụrịrị enweghị RNase. Jiri mmiri na-enweghị RNase maka nkwadebe reagent niile (gbakwunye mmiri na karama iko dị ọcha, gbakwunye DEPC na mkpokọta ikpeazụ nke 0.1% (V/V), maa jijiji n'otu abalị na autoclave).
Ngwaahịa ngwaahịa
N'IHI gịnị ka ịhọrọ anyị
Kemgbe e guzobere ya, ụlọ ọrụ mmepụta ihe anyị na -emepụta ngwaahịa klaasị mbụ ụwa na ịgbaso ụkpụrụ
nke mma mbụ. Ngwaahịa anyị enwetala ezigbo aha na ụlọ ọrụ yana ntụkwasị obi bara uru n'etiti ndị ahịa ọhụrụ na ndị agadi ..
- Tel: +86 010-59822688
- Owuwu 5, Nke 86, Shuangying West Road, Changping District, Beijing.
- people@tiangen.com
