Urity Ịdị ọcha dị elu: Akpụkpọ ahụ silica na -ekpochapụ ọtụtụ adịghị ọcha.
Use Ojiji zuru oke: Kwesịrị ekwesị maka anụ ahụ, sel, ọbara na ọtụtụ ụdị nlele ndị ọzọ.
Operation Ịrụ ọrụ ọsọ ọsọ: Enwere ike nweta mkpụrụ ndụ ihe nketa DNA n'ime elekere 1.
Ụdị: Kọlụm ogho dabere
Sample na olu mbido: 100-400 μl ọbara niile sitere na anụ mammalian, 5-20 μl ọbara niile sitere na nnụnụ ma ọ bụ amphibian, 106-107 mkpụrụ ndụ ihe nketa, 30 mg anụ ahụ
Mkpụrụ: 3-40 μg
Oge ọrụ: ~ 1 awa
Ngwa mgbada: mmachi enzyme mgbaze, nyocha PCR, nhichapụ ndịda, ọba akwụkwọ DNA, wdg.
Biko jiri nlele ọhụụ iji hụ na iguzosi ike n'ezi ihe nke gDNA dị ọcha.
■ Ọ bụrụ nmalite mmalite nlele karịrị nke ngwa a tụrụ aro ya, a na -atụ aro ka ị bulie ego Buffer GA na Buffer GB, ma kewaa kọlụm na -ebugo ya n'oge dị iche iche, ma ọ bụ jiri ogidi abụọ ogho mee nnwale.
Maka nchekwa ogologo oge nke gDNA, a na-atụ aro ịchekwa na TE echekwa. Biko hụ na OD260/OD280 uru dị na 1.7-1.9, na mkpokọta gDNA bụ 100-300 ng/μl.
Nweta DNA sitere n'omume na ọnụọgụ dị iche iche:
Enwere ike ịhazi ngwaahịa niile maka ODM/OEM. Maka nkọwa,biko pịa Ọrụ ahaziri (ODM/OEM)
A.
A-2 Lysis ezughi oke nke nlele ahụ-Agaghị agwakọta ihe nlele ahụ nke ọma na ihe nchekwa lysis. A na-atụ aro ka agwakọta ya nke ọma site na pulse-vortexing maka ugboro 1-2. —Ndị lysis sel na -ezughị ezu sitere na mbelata ọrụ proteinase K. -Ihe ezughi oke cell lysis ma ọ bụ mbibi protein n'ihi ezughị oke ịsa ahụ ọkụ. A na -atụ aro ka ebipụ anụ ahụ n'ime obere iberibe ma gbatịkwuo oge ịsa ahụ iji wepu ihe niile fọdụrụ na lysate.
A-3 mgbasa ozi DNA ezughi oke. —Enweghị ethanol ma ọ bụ pasent dị ala karịa 100% ethanol tupu agbakwunye lysate na kọlụm ogho.
A-4 Uru pH nke ịkwa iko na-adị oke ala. Gbanwee pH n'etiti 8.0-8.3.
Ethanol fọdụrụnụ dị n'elu.
- Enwere ihe nchekwa ịsa ahụ PW dị elu. Enwere ike wepu ethanol site na ịgbanye kọlụm maka nkeji 3-5, wee tinye ya na ụlọ okpomọkụ ma ọ bụ incubator 50 for maka nkeji 1-2.
A-1 Ihe nlele ahụ abụghị nke ọhụrụ. - Wepụta DNA nlele dị mma ka ọ bụrụ akara iji chọpụta ma DNA dị na nlele ahụ emebiela.
A-2 ọgwụgwọ tupu ọgwụgwọ adịghị mma. —N'ihi na ọ na -egwepịa mmiri nitrogen dị oke mmiri, iweghachite mmiri, ma ọ bụ oke nlele.
Nhazi ọkwa kwesịrị ịdị iche iche maka nlele dị iche iche. Maka nlele osisi, gbaa mbọ hụ na igwu mmiri nitrogen dị mmiri mmiri. Maka nlele anụmanụ, homogenate ma ọ bụ gwuo nke ọma na nitrogen mmiri mmiri. Maka nlele nwere mgbidi selụ nke siri ike imebi, dịka nje bacteria G+ na yist, a na -atụ aro ka ị jiri lysozyme, lyticase ma ọ bụ ụzọ igwe iji mebie mgbidi sel.
4992201/4992202 Osisi Genomic DNA Kit na-anabata usoro dabere na kọlụm nke chọrọ chloroform maka mmịpụta ya. Ọ dabara nke ọma maka nlele osisi dị iche iche, yana ntụ ntụ akọrọ. Ngwa Hi-DNAsecure Plant Kit bụkwa nke dabere na kọlụm, mana na-enweghị mkpa mmịpụta phenol/chloroform, na-eme ka ọ dị mma na anaghị egbu egbu. Ọ dabara maka osisi nwere polysaccharides dị elu na ọdịnaya polyphenol. 4992709/4992710 DNAquick Plant System na-anabata usoro dabere na mmiri. Mwepu Phenol/chloroform adịghị mkpa. Usoro nsacha dị mfe na ngwa ngwa na -enweghị oke maka mbido mbido nlele, yabụ ndị ọrụ nwere ike ịhazigharị ego ahụ n'ụzọ dị mfe dịka ihe nnwale chọrọ si dị. Enwere ike nweta nnukwu iberibe gDNA nwere nnukwu mkpụrụ.
Enwere ike ịme mwepụ DNA nke ọbara site na iji reagents enyere na ngwa abụọ a site na ịgbanwere usoro ahụ na ntuziaka akọwapụtara maka mmịpụta DNA ọbara. Enwere ike ịnye akwụkwọ dị nro nke usoro mmịpụta DNA na -egbochi ọbara mgbe ị rịọrọ.
Kwụsị ihe nlele ọhụrụ na 1 ml PBS, saline nkịtị ma ọ bụ nchekwa TE. Kpochapụrụ ihe nlele ahụ nke ọma site na homogenizer ma na -anakọta mkpali na ala nke tube site na centrifuging. Wepu ihe dị elu, wee jiri mbughari 200 GAl ga -ebughachi mmiri ozuzo. Enwere ike ịme nsacha DNA na -esote dịka ntuziaka ahụ si dị.
Maka ịdị ọcha nke gDNA na plasma, ọbara na ihe nlebara ahụ, a na -atụ aro TIANamp Micro DNA Kit. Maka ịdị ọcha nke nje gDNA site na nlele ọbara/plasma, a na -atụ aro TIANamp Virus DNA/RNA Kit. Maka ịdị ọcha nke gDNA nje site n'ọbara na nlele plasma, a na -atụ aro TIANamp Bacteria DNA Kit (ekwesịrị itinye lysozyme maka nje dị mma). Maka nlele mmiri, a na-atụ aro Hi-Swab DNA Kit na TIANamp Bacteria DNA Kit.
A na -atụ aro Kit Kit DNAsecure ma ọ bụ Sistemụ Pụkụkụ DNA maka iwepụta mkpụrụ ndụ ihe nketa fungal. Maka mmịpụta mkpụrụ ndụ ihe nketa yist, a na-atụ aro Kit Kit DNA Yist (lyticase kwadebere n'onwe ya).
Kemgbe e guzobere ya, ụlọ ọrụ mmepụta ihe anyị na -emepụta ngwaahịa klaasị mbụ ụwa na ịgbaso ụkpụrụ
nke mma mbụ. Ngwaahịa anyị enwetala ezigbo aha na ụlọ ọrụ yana ntụkwasị obi bara uru n'etiti ndị ahịa ọhụrụ na ndị agadi ..